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JECFA(联合食品添加剂专家委员会)标准

时间:2014-01-12 22:53来源:未知 作者:甜菊产业平台 点击:
甜菊糖甙
本标准为JECFA(2010)第73次会议准备,将刊登于FAO JECFA各论10(2010)中,用于取代JECFA(2008)第69次会议上通过、发布于FAO JECFA的各论5(2008)的甜菊糖甙标准。在2008年JECFA第69次大会上,确定了甜菊糖甙的ADI(每日允许摄入量)值为0~4 mg/kg bw(以甜菊醇计)。
 
同义词:INS no. 960
 
定义  甜菊糖甙从甜菊叶中获得。甜菊叶通过热水提取,水提液通过吸附树脂,提取物中的糖甙成分被树脂吸附,之后用乙醇溶液把甜菊糖甙从树脂中洗脱后用甲醇或乙醇溶液重结晶。精制过程中可能会用到离子交换树脂。成品一般通过喷雾干燥获得。
甜菊糖甙中含量最多同时也是最主要的甜味组分为甜菊甙和莱鲍迪甙A,另外甜菊糖甙还含有少量的莱鲍迪甙B、莱鲍迪甙C、莱鲍迪甙D、莱鲍迪甙F、悬钩子甙、甜菊双糖甙。
 
化学名称
甜菊甙:13-[(2-O-β-D-吡喃葡萄糖基-β-D-吡喃葡萄糖基)氧基] 贝壳杉烷-16-烯-18-羧酸-β-D-吡喃葡萄糖酯
莱鲍迪甙A:13-[(2-O-β-D-吡喃葡萄糖基-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-β-D-吡喃葡萄糖基)氧基]贝壳杉烷-16-烯-18-羧酸-β-D-吡喃葡萄糖酯
CAS  甜菊甙:57817-89-7
莱鲍迪甙A:58543-16-1
 
化学式  甜菊甙:C38H60O18
        莱鲍迪甙A:C44H70O23
 
结构式  甜菊糖甙的九种组分的结构式:
        
组分名称 R1 R2
甜菊甙 β–Glc β–Glc–β–Glc(2→1)
莱鲍迪甙A β–Glc β–Glc–β–Glc(2→1)
   ∣
   β–Glc(3→1)
莱鲍迪甙B H β–Glc–β–Glc(2→1)
   ∣
   β–Glc(3→1)
莱鲍迪甙C β–Glc β–Glc–α–Rha(2→1)
   ∣
   β–Glc(3→1)
莱鲍迪甙D β–Glc–β–Glc(2→1) β–Glc–β–Glc(2→1)
   ∣
   β–Glc(3→1)
莱鲍迪甙F β–Glc β–Glc–β–Xyl(2→1)
   ∣
   β–Glc(3→1)
杜尔可甙A β–Glc β–Glc–α–Rha(2→1)
悬钩子甙 β–Glc β–Glc
甜菊双糖甙 H β–Glc–β–Glc(2→1)
甜菊糖甙的甙元为甜菊醇(R1=R2=H)。Glc、Rha和Xyl分别为葡萄糖基、鼠李糖基和木糖基。
式量  甜菊甙:804.88
      莱鲍迪甙A:967.03
 
含量  在干燥的状态下,九种甜菊糖甙组分的总含量不低于95%。
 
描述  白色或浅黄色粉末,无气味或有轻微的特殊气味。甜度为蔗糖的200~300倍。
 
功能使用 甜味剂
 
特性
 
鉴别
 
溶解度(Vol.4 易容于水
 
甜菊甙和   与后面定量分析方法中获得的色谱图中主要色谱峰
莱鲍迪甙A  中的甜菊甙或莱鲍迪甙A相符。
 
pH(Vol.4)   4.5~7.0(1g溶于100ml水)
 
纯度
 
总灰分Vol.4   不大于1%
 
干燥失重Vol.4 不大于6%(105℃, 2h)
 
溶剂残留Vol.4 甲醇不大于200mg/kg,乙醇不大于5000mg/kg。(Vol.4法Ⅰ,参照方法总论/有机部分/溶剂残留)
 
Vol.4  不大于1mg/kg。(原子吸收氢化物法测定,用法Vol.4法Ⅱ制备试样(样品)溶液)。
 
Vol.4  不大于1mg/kg。(用原子吸收光谱/ICP-原子发射光谱法来确定具体的含量水平。样品量的大小和样品的制备方法可以根据Vol.4所述,参照方法总论/金属杂质)。
 
含量分析     在如下条件下,通过高效液相色谱法测定各单独组分的含量。
 
             试剂
             乙腈:在210nm下透光率大于95%。
 
             标准品
             甜菊甙:干燥状态下,纯度大于99.0%。
             莱鲍迪甙A干燥状态下,纯度大于99.0%。
            包含九种组分的甜菊糖甙标准溶液:包含甜菊甙、莱鲍迪甙A、莱鲍迪甙B、莱鲍迪甙C、莱鲍迪甙D、莱鲍迪甙F、杜尔可甙A、悬钩子甙和甜菊双糖甙。稀释溶液用的溶剂为水-乙腈(7:3),可以更好的确定各组分的保留时间。标准品可由日本和光纯药株式会社及美国ChromaDex公司提供。
 
 
标准溶液
分别准确称取50mg甜菊甙和莱鲍迪甙A标准品,用水-乙腈(7:3)溶液溶解,定容于50ml容量瓶。
 
样品溶液
准确称取50-100mg样品,用水-乙腈(7:3)溶液溶解,定容于50ml容量瓶。
 
分析步骤
在如下色谱条件下,进5μl样品溶液。
色谱柱:日本资生堂公司的Capcell pak C18 MG II柱或者美国菲罗门公司的Luna 5μ C18(2) 100A柱,或规格相当的色谱柱(长250mm;内径4.6mm,颗粒大小为5μm)
流动相:32:68的乙腈和磷酸盐缓冲液(10mmol/L,pH=2.6)混合液。
流速:1.0ml/min
检测器:紫外检测器,波长210nm
柱温:40℃
记录色谱时间为30分钟左右。
 
色谱峰鉴别和计算
通过比较样品溶液与标准溶液各组分的出峰保留时间(见附图),测量计算出样品中九种组分的峰面积,及通过标准溶液计算出甜菊甙和莱鲍迪甙A的峰面积。
样品中除了莱鲍迪甙A之外的其他八种组分百分含量计算公式:
X%=[Ws/W]×[fxAx/As] ×100
样品中莱鲍迪甙A百分含量的计算公式:
莱鲍迪甙A%=[WR/W] ×[Ax/AR] ×100
式中
X—甜菊糖甙的各组分
Ws─标准溶液中甜菊甙的干重(mg)
WR─标准溶液中莱鲍迪甙A的干重(mg)
W─样品溶液中样品的干重(mg)
As─标准溶液中甜菊甙的峰面积
AR─标准溶液中莱鲍迪甙A的峰面积
Ax─样品溶液中X组分的峰面积
fx─X组分与甜菊甙的式量比值:甜菊甙为1.00,莱鲍迪甙A为1.20,莱鲍迪甙B为1.00,莱鲍迪甙C为1.18,莱鲍迪甙D为1.40,莱鲍迪甙F为1.16,杜尔可甙A为0.98,悬钩子甙为0.80,甜菊双糖甙为0.80。
计算出样品中总糖甙组分的百分含量的(九个组分百分比相加)。
 

图:甜菊糖甙标准溶液9种组分的色谱图
色谱柱:Capcell pak C18 MG II柱
浓度:除莱鲍迪甙F为0.1mg/ml外,其余各组分均为0.5mg/ml。 (责任编辑:甜菊产业平台)
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