组分名称 | R1 | R2 |
甜菊甙 | β–Glc | β–Glc–β–Glc(2→1) |
莱鲍迪甙A | β–Glc |
β–Glc–β–Glc(2→1) ∣ β–Glc(3→1) |
莱鲍迪甙B | H |
β–Glc–β–Glc(2→1) ∣ β–Glc(3→1) |
莱鲍迪甙C | β–Glc |
β–Glc–α–Rha(2→1) ∣ β–Glc(3→1) |
莱鲍迪甙D | β–Glc–β–Glc(2→1) |
β–Glc–β–Glc(2→1) ∣ β–Glc(3→1) |
莱鲍迪甙F | β–Glc |
β–Glc–β–Xyl(2→1) ∣ β–Glc(3→1) |
杜尔可甙A | β–Glc | β–Glc–α–Rha(2→1) |
悬钩子甙 | β–Glc | β–Glc |
甜菊双糖甙 | H | β–Glc–β–Glc(2→1) |
式量 甜菊甙:804.88
莱鲍迪甙A:967.03
含量 在干燥的状态下,九种甜菊糖甙组分的总含量不低于95%。
描述 白色或浅黄色粉末,无气味或有轻微的特殊气味。甜度为蔗糖的200~300倍。
功能使用 甜味剂
特性
鉴别
溶解度(Vol.4) 易容于水
甜菊甙和 与后面定量分析方法中获得的色谱图中主要色谱峰
莱鲍迪甙A 中的甜菊甙或莱鲍迪甙A相符。
pH(Vol.4) 4.5~7.0(1g溶于100ml水)
纯度
总灰分(Vol.4) 不大于1%
干燥失重(Vol.4) 不大于6%(105℃, 2h)
溶剂残留(Vol.4) 甲醇不大于200mg/kg,乙醇不大于5000mg/kg。(Vol.4法Ⅰ,参照方法总论/有机部分/溶剂残留)
砷(Vol.4) 不大于1mg/kg。(原子吸收氢化物法测定,用法Vol.4法Ⅱ制备试样(样品)溶液)。
铅(Vol.4) 不大于1mg/kg。(用原子吸收光谱/ICP-原子发射光谱法来确定具体的含量水平。样品量的大小和样品的制备方法可以根据Vol.4所述,参照方法总论/金属杂质)。
含量分析 在如下条件下,通过高效液相色谱法测定各单独组分的含量。
试剂
乙腈:在210nm下透光率大于95%。
标准品
甜菊甙:干燥状态下,纯度大于99.0%。
莱鲍迪甙A:干燥状态下,纯度大于99.0%。
包含九种组分的甜菊糖甙标准溶液:包含甜菊甙、莱鲍迪甙A、莱鲍迪甙B、莱鲍迪甙C、莱鲍迪甙D、莱鲍迪甙F、杜尔可甙A、悬钩子甙和甜菊双糖甙。稀释溶液用的溶剂为水-乙腈(7:3),可以更好的确定各组分的保留时间。标准品可由日本和光纯药株式会社及美国ChromaDex公司提供。
标准溶液
分别准确称取50mg甜菊甙和莱鲍迪甙A标准品,用水-乙腈(7:3)溶液溶解,定容于50ml容量瓶。
样品溶液
准确称取50-100mg样品,用水-乙腈(7:3)溶液溶解,定容于50ml容量瓶。
分析步骤
在如下色谱条件下,进5μl样品溶液。
色谱柱:日本资生堂公司的Capcell pak C18 MG II柱或者美国菲罗门公司的Luna 5μ C18(2) 100A柱,或规格相当的色谱柱(长250mm;内径4.6mm,颗粒大小为5μm)
流动相:32:68的乙腈和磷酸盐缓冲液(10mmol/L,pH=2.6)混合液。
流速:1.0ml/min
检测器:紫外检测器,波长210nm
柱温:40℃
记录色谱时间为30分钟左右。
色谱峰鉴别和计算
通过比较样品溶液与标准溶液各组分的出峰保留时间(见附图),测量计算出样品中九种组分的峰面积,及通过标准溶液计算出甜菊甙和莱鲍迪甙A的峰面积。
样品中除了莱鲍迪甙A之外的其他八种组分百分含量计算公式:
X%=[Ws/W]×[fxAx/As] ×100
样品中莱鲍迪甙A百分含量的计算公式:
莱鲍迪甙A%=[WR/W] ×[Ax/AR] ×100
式中
X—甜菊糖甙的各组分
Ws─标准溶液中甜菊甙的干重(mg)
WR─标准溶液中莱鲍迪甙A的干重(mg)
W─样品溶液中样品的干重(mg)
As─标准溶液中甜菊甙的峰面积
AR─标准溶液中莱鲍迪甙A的峰面积
Ax─样品溶液中X组分的峰面积
fx─X组分与甜菊甙的式量比值:甜菊甙为1.00,莱鲍迪甙A为1.20,莱鲍迪甙B为1.00,莱鲍迪甙C为1.18,莱鲍迪甙D为1.40,莱鲍迪甙F为1.16,杜尔可甙A为0.98,悬钩子甙为0.80,甜菊双糖甙为0.80。
计算出样品中总糖甙组分的百分含量的(九个组分百分比相加)。
图:甜菊糖甙标准溶液9种组分的色谱图
色谱柱:Capcell pak C18 MG II柱
浓度:除莱鲍迪甙F为0.1mg/ml外,其余各组分均为0.5mg/ml。 (责任编辑:甜菊产业平台)